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產(chǎn)品詳細(xì)頁熒光原位雜交(FISH)濾光片
- 產(chǎn)品型號:
- 更新時間:2024-04-11
- 產(chǎn)品介紹:熒光原位雜交(FISH)熒光原位雜交 (Fluorescence In Situ Hybridization, FISH) 是指利用熒光染料標(biāo)記的,已知序列的單鏈核酸作為探針,通過堿基互補(bǔ)配對原則,與待檢樣品中核酸進(jìn)行特異性結(jié)合,然后通過觀察熒光信號,從而對樣品中待檢核酸進(jìn)行定性,定量及定位分析。FISH 有快速,信號強(qiáng),特異性高以及可以多重染色等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前診斷,基因組結(jié)構(gòu)分析等領(lǐng)域。
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產(chǎn)品介紹
品牌 | 其他品牌 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,電子,綜合 |
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熒光原位雜交(FISH)
熒光原位雜交 (Fluorescence In Situ Hybridization, FISH) 是指利用熒光染料標(biāo)記的,已知序列的單鏈核酸作為探針,通過堿基互補(bǔ)配對原則,與待檢樣品中核酸進(jìn)行特異性結(jié)合,然后通過觀察熒光信號,從而對樣品中待檢核酸進(jìn)行定性,定量及定位分析。FISH 具有快速,信號強(qiáng),特異性高以及可以多重染色等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前診斷,基因組結(jié)構(gòu)分析等領(lǐng)域。
影響FISH 結(jié)果的因素有很多,包括樣品準(zhǔn)備和處理,顯微鏡,光源,熒光探針以及濾光片。FISH 通?;跓晒怙@微鏡來觀測信號,所用濾光片包括激發(fā)片,二向色鏡和發(fā)射片三種。其工作原理如下圖所示:
l 激發(fā)片:選擇透過光源某部分波段的光,用來激發(fā)熒光探針;
l 二向色鏡:反射光源的光至樣品,透過產(chǎn)生的熒光并反射激發(fā)光的散射光;
l 發(fā)射片:選擇透過熒光的某部分波段的光至檢測器或人眼,并可以阻擋掉激發(fā)光的雜散光。
在 FISH 實(shí)驗(yàn)中,濾光片帶寬的大小會對 FISH 圖像的對比度產(chǎn)生重要的影響。增加帶寬會提高激發(fā)和接收效率,使接收的信號增強(qiáng)。但實(shí)際接收的信號中同時包含了探針的熒光信號和樣品的背底噪音,帶寬的增加會同時增加這兩者的強(qiáng)度。帶寬減小,雖然可以降低背底噪音的強(qiáng)度,但熒光信號也會隨之減弱 。所以對于對比度要求很高的FISH 實(shí)驗(yàn),針對于每種具體的染料,都會存在一個*的帶寬,使 FISH 圖像能夠達(dá)到*的對比度。FISH 濾光片的帶寬都是根據(jù)常用的 FISH 染料做過優(yōu)化,可以為用戶的 FISH 實(shí)驗(yàn)提供*的圖像對比度。
"B" 的信號比"A" 多91%, 但是“B" 的噪音比“A" 多226%。“A"具有更好的對比度!
FISH 濾光片組具有以下特點(diǎn) :
l 高透過率、高截止深度和高光譜陡度;
l 保證足夠亮度的同時,提供*的圖像對比度;
l 消除串色的影響;
a. 消除Gold 和Aqua 串色到Green 通道;
b. 消除Gold 和Orange 串色到Red 通道;
l 對多波段濾光片組中的DAPI 通道進(jìn)行特殊處理,避免DAPI 信號過強(qiáng)而將其他通道信號掩蓋;
l 多色圖像疊加零漂移;
l 磁控濺射鍍膜,終身質(zhì)保。
ET 系列 - FISH 單波段帶通濾光片組
濾光片組 | 激發(fā)片 CWL/FWHM | 二向色鏡 50% cut-on | 發(fā)射片 CWL/FWHM | FISH 探針 | 備注 |
49000 | 350/50 | 400 | 460/50 | DAPI |
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49028 | 395/25 | 425 | 460/50 | DAPI | 用于 395 nm 光源 |
49301 | 405/10 | 425 | 460/36 | Blue |
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49302 | 436/20 | 455 | 480/30 | Aqua |
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49303 | 495/25 | 515 | 537/29 | Green | 用于有 Aqua,無 Gold 時 |
49308 | 485/25 | 505 | 525/30 | Green | 用于無 Aqua,有 Gold 時 |
49312 | 490/20 | 505 | 525/20 | Green | 用于有 Aqua,有 Gold 時 |
49313 | 490/20 | 505 | 520/20 | Green | Ventanta FISH 或免疫熒光 |
49304 | 546/10 | 556 | 572/23 | Gold |
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49305 | 546/22 | 565 | 590/33 | Orange | 用于無 Red 時 |
49309 | 539/21 | 556 | 576/31 | Oange | 用于有 Red 時 |
49306 | 580/25 | 600 | 625/30 | Red | 用于無 Gold,無 Orange 時 |
49310 | 592/21 | 610 | 630/30 | Red | 用于有 Gold,無 Orange 時 |
49311 | 599/13 | 612 | 632/28 | Red | 用于有 Orange 時 |
49307 | 630/20 | 647 | 667/30 | Far Red |
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49009 | 640/30 | 660 | 690/50 | Far Red |
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ET 系列 - FISH 多波段濾光片組
DAPI 是一種能夠與DNA雙鏈特異性結(jié)合的有機(jī)熒光染料。在 FISH 實(shí)驗(yàn)中,DAPI 主要用來對整個細(xì)胞核進(jìn)行染色成像,這就導(dǎo)致了 DAPI 的濃度要遠(yuǎn)高于其他 FISH 探針的濃度。而在有些 FISH 實(shí)驗(yàn)流程中,DAPI 是在最后一步進(jìn)行染色,染色之后也沒有清洗的步驟。
在使用多波段濾光片進(jìn)行多色 FISH 實(shí)驗(yàn)中,為了避免DAPI 的信號將其他 FISH 探針的信號掩蓋,在 多波段濾光片組中,會刻意降低激發(fā)片在 DAPI 處的透過率,從保證 DAPI 的信號不至于過高(見下圖)。
DAPI 和 Aqua 的發(fā)射峰高度重疊,通常情況下同時做兩種探針的成像會很困難,因?yàn)榇罅康?/span> DAPI 信號會將 Aqua 信號掩蓋掉。
69014 濾光片組,通過降低 DAPI 的激發(fā)效率,能夠?qū)崿F(xiàn)DAPI,Aqua,Green 和 Orange 四色的同時觀察。 DAPI 和Aqua 采用不同的激發(fā)波段,但共享同一個接收通道(見下圖)。
ET 系列 - FISH 多波段濾光片組
濾光片組 | FISH 探針 | ||||||
DAPI | Aqua | Green | Gold | Orange | Red | Far Red | |
59001v2 | • |
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59002v2 | • |
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69013v2 | • |
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69014 | • | • | • |
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89084v | • |
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8908 | • |
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1. 為保證 Green 和 Orange 強(qiáng)度接近,59011 適用于汞燈和鹵素?zé)艄庠矗?/span>59012 適用于 LED 光源;
2. 含一個雙波段激發(fā)片,用于同時激發(fā) Green 和 Orange;一個三波段激發(fā)片,用于同時激發(fā) DAPI,Green 和 Orange;三個單波段激發(fā)片,用于 分別激發(fā) DAPI,Green 和 Orange;
3. 含一個雙波段激發(fā)片,用于同時激發(fā) Green 和 Red;一個三波段激發(fā)片,用于同時激發(fā) DAPI,Green 和 Red;三個單波段激發(fā)片,用于分別 激發(fā) DAPI,Green 和 Red。
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