激光掃描/轉(zhuǎn)盤共聚焦顯微鏡
激光掃描和旋轉(zhuǎn)圓盤共聚焦顯微鏡在技術(shù)上相似,但用于不同的目的。激光掃描共聚焦顯微鏡最/常用于觀察固定樣品,可以產(chǎn)生非常薄的光學(xué)切片。在大多數(shù)儀器中,由于激光逐點掃描樣本需要時間,因此這是一個較慢的過程。旋轉(zhuǎn)圓盤共聚焦顯微鏡常用于活細胞樣品,因為光漂白對樣品造成的損壞較小,因此可以觀察樣品隨時間的變化。
在這兩種應(yīng)用中,高濾光片透射率是必/不可/少的,因為在這兩種情況下,發(fā)射光都必須在到達相機之前通過針孔,從而降低圖像的亮度。 Semrock 的BrightLine®濾光片在市場上的所有濾光片中具有最高的透射率。
我們還提供專為Yokogawa 的轉(zhuǎn)盤共聚焦系統(tǒng)設(shè)計的 BrightLine 濾光片。這些系統(tǒng)被認為是市場上最/先/進的系統(tǒng),需要具有嚴格公差的特殊尺寸過濾器。我們提供的Yokogawa濾光片兼容所有掃描頭系統(tǒng)配置,無論您選擇何種顯微鏡、相機和軟件平臺。
光密度OD
光學(xué)密度(Optical Density或稱為 OD)是描述光通過高度阻擋的光學(xué)濾光片(當(dāng)光的傳輸非常小時)的透過率的一種方便工 具。OD簡單地定義為對數(shù)(底為10)的負變量。變量在0和1之間變化(OD = – log10(T))。因此,透過率就簡單等于10的負OD值的 方 (T = 10– OD), 左圖顯示了OD的影響:6個數(shù)量級(1000000次)的透過率變化,非常簡單地用介于0到6的數(shù)字來表示;下面中間 的示例表和右下的“法則”列表提供了一些方便的技巧,可以在 OD 和透過率之間快速轉(zhuǎn)換。將變量 T 乘以2(或除以10)等于減 去0.3(或加上1),就轉(zhuǎn)換成了 OD 。
光密度本底噪聲:
通過精心優(yōu)化我們的測量設(shè)備和方法,Semrock能夠提供一些優(yōu)化的寬帶光密度(OD)。以下是此網(wǎng)站上顯示的大多數(shù)測量數(shù)據(jù)的典型OD噪聲本底限制。
對于介于320和1120 nm之間的波長,接近或低于3e-7(光學(xué)密度6.5)的透射值受到測量噪聲的限制。
對于波長<320 nm且在1120-1500 nm之間的波長,接近或低于3e-6(光學(xué)密度5.5)的透射值受到測量噪聲的限制。
對于大于1500 nm的波長,接近或低于1e-5(光學(xué)密度5.0)的透射值受到測量噪聲的限制。
同樣,對于某些濾光片和/或某些阻擋波長范圍,顯示的本底噪聲僅為OD 4。
激光損傷閾值
激光對濾光片的損傷程度取決于多重因素,因此很難保證濾光片在所有可能情況下的性能。然而,確定激光損傷閾值(LDT)是有用的,使脈沖通量或強度低于該閾值就不太可能損害濾光片。
激光損傷閾值計算器
Semrock的激光損傷閾值計算器僅供參考/指導(dǎo)用途。
LDT計算器不適用的情況:LIDT試驗中激光損壞僅為某項關(guān)鍵參數(shù)時。即:此計算器僅適用于激光是唯/一的損傷源,環(huán)境中沒有其他的損傷源,如分子污染、物理污染、安裝應(yīng)力、溫度等環(huán)境變量,大多數(shù)光學(xué)器件從未達到理想的計算LDT。LDT計算器根據(jù)標(biāo)稱規(guī)格按激光波長和脈沖持續(xù)時間進行縮放,但應(yīng)注意的是,盡管方程式在納秒范圍內(nèi)相當(dāng)線性地縮放,但當(dāng)切換為皮秒級時,損傷機理從主要是熱破壞變?yōu)殡娮訐舸?。脈沖持續(xù)時間。最后,大多數(shù)光學(xué)器件將具有特定的區(qū)域,這些區(qū)域由于材料吸收而具有較低的激光損傷閾值,其中包括OH線和較低的UV波長范圍。
某個產(chǎn)品的激光損傷閾值是多少?
LDT規(guī)格可在“規(guī)格”選項卡的“光學(xué)損壞等級”標(biāo)題下的每個產(chǎn)品網(wǎng)頁上找到?;蛘呤褂糜嬎闫?,在第一項下拉菜單“Product Family”中選擇對應(yīng)的產(chǎn)品系列。該系列產(chǎn)品的激光損傷閾值即會出現(xiàn)在計算器頁面的右邊。
如何使用激光損傷閾值LDT計算器?
IBS離子束濺射硬鍍膜的Semrock濾光片提供了高的激光損傷閾值,但是這不意味著其可以接受無上限的激光強度,更關(guān)鍵的是,你需要計算出安全使用的光斑大小,在此之內(nèi)使用。使用此LDT激光損傷閾值計算器,屬于激光器的類型和功率等參數(shù),然后嘗試變化使用的光斑大小,直到綠色的安全信號出現(xiàn)。
各種不同類型的激光器是如何造成濾光片損傷的?
脈沖激光器對比連續(xù)波激光器: 脈沖激光器在一系列持續(xù)時間 τ 為的脈沖中以重復(fù)率 R 和峰值能量 Ppeak發(fā)射光,連續(xù)波(cw)激光器以恒定功率P發(fā)射穩(wěn)定的光束。大多數(shù)激光器的脈沖激光平均功率 Pavg 和連續(xù)激光恒定功率通常在幾毫瓦(mW)到瓦特(W)之間。本注釋末尾的表格總結(jié)了用于表征脈沖激光器輸出的關(guān)鍵參數(shù)。
下表概述了三種主要類型的激光器預(yù)計會發(fā)生激光損傷的條件。
單位: P 用 Watts; R 用Hz; 直徑 用 cm; LDTLPin J/cm2.
注意: lspec 和tspec 分別是波長和脈沖寬度, 在其中 LDTLP 已指/定。
* 連續(xù)波激光器和準(zhǔn)連續(xù)波激光器的情況是粗略的估計,不作為保證規(guī)格。
長脈沖激光器:
通常根據(jù) “長脈沖激光器” 的脈沖密度來指/定長脈沖的損傷閾值。因為脈沖之間的時間是如此之大(毫秒),受輻照的材料能夠熱放松-因此損壞通常不是熱誘導(dǎo)的, 而是由幾乎瞬間的電介質(zhì)擊穿引起的。通常損壞的結(jié)果是材料的表面或體積缺陷以及附近的不規(guī)則光場特性。Semrock濾光片 LDTLP 1 J/cm2 ,因此被認為是 “高功率激光質(zhì)量” 組件。一個重要的例外是窄帶激光線濾光片,其內(nèi)部場強強烈地集中在幾層薄膜涂層中,從而產(chǎn)生了大約小一個數(shù)量級的 LDTLP 。
連續(xù)(cw)激光器:
cw 激光器的損壞往往是由熱 (加熱) 效應(yīng)引起的?;谶@個原因,對于 cw 激光器,LDTCW更加依賴于樣品的材料和幾何性質(zhì),因此,與長脈沖激光器不同,用單個數(shù)量來指 /定是更加困難的。基于這個原因,Semrock 不測試也不指/定其濾光片產(chǎn)品的 LDTCW 。作為一個很大概的規(guī)則,許多全玻璃組件,如介質(zhì)膜的反射鏡和濾光片都有一個 LDTCW (強度指/定為 kW/ cm2 ) ,這個值至少是長脈沖激光激光損傷閾值LDTLP 的10倍(指/定為強度來定量,單位是 J/cm2)。
準(zhǔn)連續(xù)激光:
準(zhǔn)連續(xù)激光是在飛秒 (fs) 到皮秒 (ps) 范圍內(nèi),脈寬 τ 的脈沖激光。而且,高功率激光器的重復(fù)頻率通常在 10-100 MHz 左右。這些激光器通常是鎖模的,這意味著頻率由激光腔內(nèi)的光的往返時間決定的。這樣高的重復(fù)頻率,脈沖之間的時間非常短,不可能發(fā)生熱松弛。因此,在 LDT 方面,準(zhǔn)連續(xù)激光通常大概按照類似連續(xù)激光器處理,使用平均強度代替連續(xù)激光強度。
舉例: 雙頻 Nd:YAG 激光器,波長為 532 nm,假設(shè)該激光器的參數(shù)為: τ = 10 ns, R = 10 Hz, 和 Pavg = 1 W. 那么 D = 1 x10–7,E = 100 mJ, 并且 Ppeak= 10 MW. 對于光斑直徑 = 100 μm, F = 1.3 kJ/cm2, 所以某產(chǎn)品 LDTLP = 1 J/cm2 就和可能被損壞. 但是,如果使用時的光斑直徑 = 5 mm, F = 0.5 J/cm2, 此時,這個濾光片產(chǎn)品就很可能不會被損壞。
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